752型分光光度計結構原理與使用方法

752型分光光度計為紫外光柵分光光度計，測定波長200nm～800nm。

1.結構原理
752型分光光度計由光源室、單色器、樣品室、光電管暗盒、電子系統及數字顯示器等 部件組成，儀器的工作原理如圖Ⅱ-5-14所示。 儀器內部光路系統如圖Ⅱ-5-15所示。 從鎢燈或氫燈發出的連續輻射經濾色片選擇聚光鏡聚光后投向單色器進狹縫，此狹縫正好位 于聚光鏡及單色器內準直鏡的焦平面上，因此進入單色器的復合光通過平面反射鏡反射及準 直鏡變成平行光射向色散光柵。光柵將入射的復合光通過衍射作用形成按照一定順序均勻排 列的連續單色光譜，此時單色光譜重新返回到準直鏡，然后通過聚光原理成像在出射狹縫上 。出射狹縫選出指定帶寬的單色光通過聚光鏡落在試樣室被測樣品中心，樣品吸收后透射的 光經光門射向光電管陰極面。根據光電效應原理，會產生一股微弱的光電流。

此光電流經電 流放大器放大，送到數字顯示器，測出透光率或吸光度，或通過對數放大器實現對數轉換， 顯示出被測樣品的濃度C值。

圖Ⅱ-5-14 752型分光光度計結構原理圖

圖Ⅱ-5-15 752型分光光度計光學系統圖 1.鎢燈;2.濾色片;3.氫燈;4.聚光鏡;5.進狹縫;6.保護玻璃;7.反射鏡;8.準直鏡;9.光柵;10.保護玻璃;11.出狹縫;12.聚光鏡;13.樣品;14.光門;15.光電管。

2.使用方法
752型分光光度計的外部面板如圖Ⅱ-5-16所示。
1) 將靈敏度旋鈕調到“1”檔(放大倍數最小)。
2) 打開電源開關，鎢燈點亮，預熱30min即可測定。若需用紫外光則打開“氫燈”開關，再按氫燈觸發按鈕，氫燈點亮，預熱30min后使用。
3) 將選擇開關置于“T”。
4) 打開試樣室蓋，調節0%旋鈕，使數字顯示為“0.000”。
5) 調節波長旋鈕，選擇所需測的波長。
6) 將裝有參比溶液和被測溶液的比色皿放入比色皿架中。
7) 蓋上樣品室蓋，使光路通過參比溶液比色皿，調節透光率旋鈕，使數字顯示為100.0%(T)。如果顯示不到100.0%(T)，可適當增加靈敏度的檔數。然后將被測溶液置于光路中，數字顯示值即為被測溶液的透光率。
8) 若不需測透光率，儀器顯示100.0%(T)后，將選擇開關調至“A”，調節吸光度旋鈕，使數字顯示為“000.0”。再將被測溶液置于光路后，數字顯示值即為溶液的吸光度。
9) 若將選擇開關調至“C”，將已知標定濃度的溶液置于光路，調節濃度旋鈕使數字顯示為標定值，再將被測溶液置于光路，則可顯示出相應的濃度值。

圖Ⅱ-5-16 752型分光光度計面板圖
1.數字顯示器; 2.吸光度調零旋鈕; 3.選擇開關; 4.濃度旋鈕; 5.光源室; 6.電源室; 7.氫燈電源開關; 8.氫燈觸發按鈕; 9.波長手輪; 10.波長刻度窗; 11.試樣架拉手; 2. 100%T旋鈕; 13. 0%T旋鈕; 14. 靈敏度旋鈕; 15. 干燥器。
3.注意事項
1) 測定波長在360nm以上時，可用玻璃比色皿;波長在360nm以下時，要用石英比色皿。比色皿外部要用吸水紙吸干，不能用手觸摸光面的表面。
2) 儀器配套的比色皿不能與其它儀器的比色皿單個調換。如需增補，應經校正后方可使用。
3) 開關樣品室蓋時，應小心操作，防止損壞光門開關。
4) 不測量時，應使樣品室蓋處于開啟狀態，否則會使光電管疲勞，數字顯示不穩定。
5) 當光線波長調整幅度較大時，需稍等數分鐘才能工作。因光電管受光后，需有一段響應時間。
6) 儀器要保持干燥、清潔。